基因重组技术

技术原理与历史沿革 分子克隆的生物学基础 限制性内切酶克隆作为基因重组技术的基石,通过特异性切割DNA实现精准片段连接。其核心流程包含三个关键步骤: 载体与插入片段的酶切处理 互补末端连接形成重组DNA 重组质粒转化宿主细胞扩增 [表1:核心操作要素对比] 要素类型 载体要求 插入片段要求 末端匹配 特异性酶切位点 同源酶切位点 浓度控制 超螺旋结构纯度>90% 片段完整性