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一、PCR技术的基础与挑战PCR（聚合酶链式反应）是现代分子生物学中一项至关重要的技术，它能够在短时间内将微量的DNA扩增数百万倍。这项技术的原理并不复杂，简单来说，就是通过高温变性、低温退火和适温延伸三个步骤的循环，使DNA聚合酶能够以引物为起点，合成新的DNA链。然而，在实际操作中，PCR面临着许多挑战。比如，引物的设计不合理会导致非特异性扩增，从而降低基因克隆的效率。此外，DNA模板的质量和