Illumina作为测序行业的龙头企业,所占市场份额达70%(15年)。最初由四位博士于1998年共同创建,总部位于美国加利福尼亚圣地亚哥,主要销售微阵列芯片,于2000年在纳斯达克挂牌上市。2006年收购Solexa公司,获得新一代高通量测序技术,从而成为目前市场上的主流测序技术公司。

Illumina 旗下测序仪器
GA系列:Genome Analyzer, Genome analyzer IIx
HiSeq 系列: HiSeq 2000, HiSeq 2500, HiSeq3000, HiSeq 4000
Miseq系列
HiSeq X系列: HiSeq X Five, HiSeq X Ten
NextSeq系列:NextSeq 500, NextSeq 550
Illumina测序原理
Illumina测序采用边合成边测序技术(Sequencingby sythesis,SBS), 步骤如下:
Illumina测序采用边合成边测序技术(Sequencing by sythesis,SBS).步骤如下:
步骤一.建库,在DNA片段两端加上序列已知的通用接头构建文库,文库加载到测序芯片Flowcell
步骤二. 簇生成。文库两端的已知序列与Flowcell基底上的Oligo序列互补,每条文库片段都经过桥式PCR扩增形成一个簇
步骤三. 簇扩增及测序。与步骤二同时进行。即在碱基延伸过程中,每个循环反应只能延伸一个正确互补的碱基,根据四种不同的荧光信号确认碱基种类,保证最终的核酸序列质量,经过多个循环后,完整读取核酸序列。
什么是Flowcell?什么是Lane?
(图片摘自千年基因)
上图展示的是FlowCell, 以HiSeq2000为例:
每个flowcell有8个泳道,一个泳道称为一个Lane,每条Lane上有两列,每列有多个有小格子,叫一个tile。
测序仪器不同,可以放置的FlowCell个数和Lane的条数也有所区别。
下面一张图展示建库以及簇生成。
Illumina仪器系列介绍
1) Genome Analyzer,GA最初是Solexa公司自己推出的NGS系统。2006年Illumina公司收购了Solexa,在不断测序和改良后,推出了GA IIx和HiSeq2000平台。目前GA系列已不再出售。
2) HiSeq 系列。HiSeq2000发布后,2010年华大基因利用国开行给的贷款购买了128台HiSeq测序仪,这笔订单是Illumina迄今为止最大的一笔订单。后续通量不断扩大升级, 价格/G不断降低. HiSeq X Ten又是2014年推出的一个更大升级,将10台HiSeq X连接起来,当然仪器价格会高,但如果达到通量,单G数据成本也会大大降低。由于HiSeq X Ten价格太高,通量太大,2015年又推出了HiSeq X five, HiSeq X Ten的缩小版,由五台HiSeq X组成,同时推出的还有HiSeq 3000/4000和NextSeq 550.
其中Hiseq X Five和HiSeq X Ten显示为单台Hiseq X的性能。
3) MiSeq
测序时间快,可以用小基因组或者外显子的测序。测序成本相对HiSeq要高
4) NextSeq
NextSeq 500 于2014年初登陆市场,测序通量介于MiSeq与HiSeq之间,是目前最为灵活的测序平台,可以进行高中低通量的需求,例如外显子、转录组、人的全基因组测序等。2015年,新推出了NextSeq 550系统,整合了高通量测序和芯片扫描功能,测序模块与NextSeq 500完全相同,适用于细胞遗传学和生殖健康。
参考整理来自Illumina官方网站和网络资源
原文地址:http://blog.sina.com.cn/s/blog_5c2f929b0102w5b8.html
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